مدل سازی سرطان پستان متاستازی در موش balb/c با استفاده از رده سلولی موشی و نشاندار نمودن پایدار رده سلولی با وکتور لنتی ویروسی

نویسندگان

سمیرا محمدی یگانه

بخش ژنتیک مولکولی و مهندسی ژنتیک، مرکز تحقیقات و فناوری بن یاخته، تهران، ایران مهدی پریان

بخش ژنتیک مولکولی و مهندسی ژنتیک، مرکز تحقیقات و فناوری بن یاخته، تهران، ایران کیهان آزادمنش

بخش ویروس شناسی، انستیتوپاستورایران، تهران، ایران احسان عارفیان

بخش ژنتیک مولکولی و مهندسی ژنتیک، مرکز تحقیقات و فناوری بن یاخته، تهران، ایران فرزانه بتول رحیمی

چکیده

مقدمه: متاستاز ، عامل اصلی مرگ­های با منشأ سرطان پستان است که علیرغم پیشرفت­های علمی اخیر، تغییرات ژنتیکی و مکانیسم­های مولکولی درگیر در متاستاز سرطان پستان هنوز به­طور کامل شناخته نشده­اند. مدل­های حیوانی مناسبی نیز برای بررسی مسیرهای سلولی و ژن­هایی که به­طور اختصاصی در جریان متاستاز سرطان نقش دارند، وجود ندارند. در مطالعه اخیر، مدل متاستازی سرطان پستان موشی با استفاده از رده سلولی 4t1 ایجاد شد. همچنین این رده سلولی با ساخت و وارد نمودن وکتور لنتی ویروسی، نشاندار و به موش تزریق شد که می­تواند در تحقیقات آینده به­کار برده شود.   روش بررسی: رده سلولی ( 4t1 (crl-2539 از بانک سلولی گرفته شد. تست تشکیل کلونی در آگار برای تأیید مهاجم بودن سلول­ها انجام شد. سلول­ها پس از یک شبانه­روز کشت اولیه در محیط dmem حاوی 10 درصد سرم جنین گوساله، تریپسینه و شمارش شدند. دو گروه موش به­عنوان شاهد و مورد انتخاب شدند. به 3 موش گروه مورد تزریق درون­رگی و به 3 موش دیگر تزریق در ناحیه نزدیک پستان ( fadpad#8 ) انجام شد و به گروه شاهد فقط آب مقطر استریل تزریق گردید. موش­ها به­صورت روزانه از نظر سلامت جسمانی مورد بررسی قرار ­گرفتند تا اینکه در روز 28 قربانی شدند و بافت­های مورد نظر برای تهیه لام و بررسی پاتولوژی فرستاده شدند. سلول­های این رده با استفاده از لنتی ویروس حاوی پلاسمید pl-rgfp به­صورت پایدار نشاندار شدند و دوباره به موش balb/c ماده تزریق شدند. بررسی مدل زنده با استفاده از invivo imaging انجام شد.   یافته­ها: از میان دو گروه مورد بررسی، علایم عصبی و عضلانی- استخوانی نشان­دهنده متاستاز سلول­های سرطانی در موش­هایی که تزریق درون رگی شده بودند، زودتر مشاهده شد و بررسی­های پاتولوژی نیز درگیری وسیع بافت­ها توسط سلول­های سرطانی را تأیید کرد.   نتیجه­گیری: رده سلولی 4t1 می­تواند مدل موشی مرحله متاستازی سرطان پستان را به­خوبی بازسازی نماید. رده سلولی نشاندارشده پایدار با وکتور لنتی ویروسی می­تواند برای ردیابی سلول­های سرطانی و کارهای تحقیقاتی آینده به­خوبی به­کار گرفته شود.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

مدل‌سازی سرطان پستان متاستازی در موش BALB/c با استفاده از رده سلولی موشی و نشاندار نمودن پایدار رده سلولی با وکتور لنتی ویروسی

  مقدمه: متاستاز ، عامل اصلی مرگ­های با منشأ سرطان پستان است که علیرغم پیشرفت­های علمی اخیر، تغییرات ژنتیکی و مکانیسم­های مولکولی درگیر در متاستاز سرطان پستان هنوز به­طور کامل شناخته نشده­اند. مدل­های حیوانی مناسبی نیز برای بررسی مسیرهای سلولی و ژن­هایی که به­طور اختصاصی در جریان متاستاز سرطان نقش دارند، وجود ندارند. در مطالعه اخیر، مدل متاستازی سرطان پستان موشی با استفاده از رده سلولی 4T1 ایجا...

متن کامل

بیان القایی ژن گزارشگرGFP در رده سلولی LMH با استفاده از ناقلین لنتی ویروسی القا پذیر

هدف: با تلفیق سیستم االقایی تتراسیکلین (Tet-inducible system) و ناقلین لنتی ویروسی، القا بیان ژن گزارشگر Enhanced Green Fluorescent Protein (EGFP) در سلول‏های پرندگان مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش‏ها: ژن EGFP تحت کنترل سیستم‏ Tet-ON قرار گرفت و بیان آن در سلول‌های کبدی جوجه رده LMH بررسی شد. ابتدا باکتری‏های مستعد با ناقل لنتی ویروسی القایی حامل EGFP به‏همر...

متن کامل

بیان القایی ژن گزارشگرgfp در رده سلولی lmh با استفاده از ناقلین لنتی ویروسی القا پذیر

هدف: با تلفیق سیستم االقایی تتراسیکلین (tet-inducible system) و ناقلین لنتی ویروسی، القا بیان ژن گزارشگر enhanced green fluorescent protein (egfp) در سلول‏های پرندگان مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش‏ها: ژن egfp تحت کنترل سیستم‏ tet-on قرار گرفت و بیان آن در سلول های کبدی جوجه رده lmh بررسی شد. ابتدا باکتری‏های مستعد با ناقل لنتی ویروسی القایی حامل egfp به‏همراه یک ناقل دوم که فعال کننده tet (t...

متن کامل

ساب کلونینگ ژن آنزیم گلوکوسربروزیداز موش سوری در وکتور لنتی ویرال و انتقال آن به رده سلولی HEK

سابقه و هدف: ژن‌درمانی یکی از مهم­ترین شیوه‌های تحقیقات بالینی است که ارایه‌دهنده­ی روش‌های جدیدی برای درمان نقص‌های ژنتیکی می‌باشد. نقص ژنتیکی آنزیم گلوکوسربروزیداز ( Gba ) عامل بیماری گوشه بیش از بقیه‌ی بیماری‌ها در ژن‌درمانی مورد توجه قرار گرفته است. هدف از انجام این پروژه کلونینگ و انتقال ژن آنزیم گلوکوسربروزیداز توسط لنتی ویرال وکتور ارتقایافته به رده‌ی سلول‌های HEK می‌باشد. مواد و روش‌ها:...

متن کامل

تأثیر سیلیبینین بر القاءآپوپتوز و مهار رشد سلولی در رده سلولی M‏CF-7 سرطان پستان

سابقه و هدف: سرطان پستان یکی از رایج‌ترین عوامل مرگ و میر ناشی از بدخیمی در زنان است. سیلیبینین یک ترکیب فلاونولیگنان از گیاه خار مریم (Silybum maianum) استخراج شده و ویژگی ضد سرطانی آن در سلول‌های کبدی مورد بررسی قرار گرفته است. در این مطالعه اثر سیلیبینین بر میزان بیان ژنی P53، رشد و آپوپتوز در رده سلولی MCF-7 مورد بررسی قرار گرفته است. مواد و روشها: با کشت سلول‌های MCF-7 در RPMI1640 و تیمار...

متن کامل

اثر ضد تکثیری نانو نقره سنتز شده با استفاده از گیاه آب بشقابی بر رده سلولی سرطان پستان

چکیده   زمینه و هدف: استفاده از گیاهان جهت سنتز نانوذرات یکی از روش‌های دوست‌دار محیط زیست به شمار می‌رود. هدف از این تحقیق، سنتز سبز نانوذره نقره با استفاده از عصاره Centella asiatica و بررسی اثرات سایتوکسیک در رده سلولی سرطان پستان بود.   روش بررسی: در این مطالعه تجربی ریخت‌شناسی نانوذرات نقره زیستی با استفاده از آنالیز میکروسکوپ الکترونی گذاره(TEM) و میکروسکوپ الکترونی روبشی (SEM) مورد ار...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
بیماری های پستان

جلد ۴، شماره ۱، صفحات ۷-۱۲

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023